تثبيط نشاط أنزيم التربتوفانيز بواسطة الكركمين: تنقية وتوصيف الانزيم من الاشريكيه القولونية

الملخص

هدفت هذه الدراسة الى استخدام الكركمين للحد من نشاط انزيم التربتوفانيز. يعرف الكركمين بأسم Diferuloylmethane (C₂₁H₂₀O₆) ، وهو مركب حيوي طبيعي مستخلص من جذور نبات الكركم (Curcuma longa L. rhizomes) ، ويتميز بخصائص مضادة للأكسدة، و بسميه خلويه ضئيله أو معدومه. أظهرت نتائج التثبيط أن أعلى تركيز للكركمين (250 ميكروغرام/مل) حقق تثبيطًا كاملاً لإنزيم التربتوفاناز، بينما حقق أقل تركيز للكركمين (62.5 ميكروغرام/مل) فعالية تثبيطية بنسبة 95%. يُعتبر إنزيم التربتوفانازعاملًا مرتبطًا بضراوة البكتيريا، ويلعب دورًا في تطور العدوى وانتشارها. تم تنقية الانزيم من بكتريا الاشريكيه القولونية المعزولة من عدوى المسالك البولية عن طريق الترسيب باستخدام كبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع 70% بالإضافة إلى كروماتوغرافيا التبادل الأيوني، وكروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام عمود سيفادكس G-150 وخلال مرحلة التنقية النهائية، ازداد النشاط النوعي للإنزيم الخام من13.5 وحدة\ ملغم بروتين الى 71.4 وحدة\ ملغم بروتين ووفقًا لدراسة توصيف الإنزيم النقي، فقد كانت تأثيرات الاس الهيدروجيني وثباته عند الرقم الهيدروجيني، بالإضافة إلى درجة الحرارة وثباته عند درجة حرارة حيث اظهرت النتائج ,88

(للأس الهيدروجيني)، و 32, 37, 42 درجة مئوية (لدرجة الحرارة)، على التوالي.