استخلاص وتنقية أنزيم البيتاكالاكتوسايديز β – Galactosidase من كبد الأغنام المحلية

الملخص

تضمنت الدراسة اختيار افضل طريقة لاستخلاص أنزيم البيتاكالاكتوسايديز من كبد الأغنام المحلية, من بين ثمان طرائق, و كان استخدام دارئ الفوسفات (0.2 مولاري وبدالة حموضة 7) هو الأفضل في استخلاص الأنزيم  بفعالية كلية بلغت (78898.5) وحدة. ركز المحتوى البروتيني باستخدام كبريتات الأمونيوم (60)%من بين خمس طرائق للتركيز (التنقية الجزئية), وأكملت مراحل التنقية باستخدام التبادل الأيوني  والترشيح الهلامي بعمود DEAE – Sephadex A100  , ومن ثم استخدام الترشيح الهلامي بعمود السيفاكريل   (  . (Sephacryl S – 300

إذ بلغت الفعالية النوعية ( 3328.8 ) وحدة / ملغم بروتين والحصيلة الأنزيمية مقدارها (41.84)% وعدد مرات التنقية (8.57) مرة. وثم التأكد من نقاوة الأنزيم بأجراء عملية الترحيل الكهربائي بغياب المواد الماسخة للبروتين إذ ظهرت حزمة بروتينية واحدة في هلام متعدد أكريل أمايد. كان الوزن الجزيئي هو (180) كيلودالتون مقدراً بطريقة الترشيح الهلامي.